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赛默飞离子色谱柱选择、清洗、存放的几个要点

发布日期: 2019-08-05
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   赛默飞离子色谱柱是一种通过检测液体中阴阳离子的常量以及痕量的测量方式,在该过程中,利用抑制住抑制水质中电解质的背景导电率的目的,是高效液相色谱。赛默飞离子色谱的特点主要在于利用了树脂材料,而其进样体积较小,对于淋出液能够进行在线自动连接的电导检测。一般采用酸、碱及盐的水溶液作为流动相,要求系统可以耐酸、耐碱,因此通常赛默飞离子色谱装置采用非金属材质。
  一、赛默飞离子色谱柱的选择
  1、样品是极性的且弱酸性的就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测,即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱
  2、如果样品极性太强,或酸性太强;可以选择CN,NH2,或硅胶柱,HILIC(亲水色谱),也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱。缺点是离子对试剂平衡时间长,对流动相pH要求比较精密,否则很难重复实验,另外离子对试剂很难洗下来,基本上用了离子对的色谱柱就不能再用于其它实验。
  3、若样品是碱性的可选择高纯硅胶柱(高纯硅胶缺少金属杂质,且硅胶端基封尾)或一些经过修饰的C18柱(如极性嵌入技术或碱去活技术等),他们都会减少碱性化合物的拖尾,一般会选择中性或偏碱的条件下做,因为这样可增加碱性样品的保留。
  4、如果碱性化合物的极性太强,或碱性太强;可以选择宽pH的C18色谱柱在高pH值检测,优点是方法开发简单,缺点是目前实现这一技术的色谱柱品牌比较少,价格也高。或者选用HILIC色谱柱(硅胶柱在反相条件下使用,这也是很经典的检测碱性样品的方法)选择强离子交换柱。缺点是不能用来分析其它样品,对流动相pH要求比较精密,否则很难重复实验。也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱。
  二、赛默飞离子色谱柱的清洗
  1.对所做的样品要有充分的了解
  用对该样品洗脱能力zui强的流动相清洗
  2、硅胶柱的一般方法
  先用甲醇法洗去极性杂质
  用干燥的二氯甲烷、正庚烷100~200ml依次活化
  3、键合相柱(烷基)的一般方法
  20倍柱体积德:甲醇-氯仿-甲醇-水依次冲洗
  柱子尺寸柱子体积冲洗体积
  150*4.6mm2.5ml50ml
  200*4.6mm3.3ml65ml
  250*4.6mm4.2ml80ml
  三、赛默飞离子色谱柱的存放
  1、存放前的处理(除去杂质、盐)
  2、合适的存放溶剂
  3、避免色谱柱床的干枯
  4、避免机械震动
  5、防止细菌生长
  6、注意存放的温度
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