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高效液相色谱柱压力过高或者过低的处理措施

发布日期: 2019-05-17
浏览人气: 64
   高效液相色谱柱在使用一段时间后,会出现一定的常见故障,如果不能很好的判断并解决就会影响色谱柱的使用效果,从而影响样品的分析结果。下面我们介绍下高效液相色谱柱压力过高或者过低的处理方法:
  一、柱压问题柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。
  1、高效液相色谱柱压力过高:
  这是高效液相在使用中最常见的问题,指的是压力突然升高,一般都是由于流路中有堵塞的原因。此时,我们应该分段进行检查。
  (1)首先断开真空泵的入口处,此时,PEEK管里充满液体,使PEEK管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴下,如果,液体不滴或缓慢滴下,则是溶剂过滤头堵塞。
  处理方法:
  用30%的硝酸浸泡半个小时,在用超纯水冲洗干净。如果液体自由滴下,溶剂过滤头正常,再检查;
  (2)打开Purge阀,使流动相不经过柱子,如果压力没有明显下降,则是过滤白头堵塞。
  处理方法:
  将过滤白头取出,用10%的异丙醇超声半个小时。如果压力降至100PSI(6.7Bar)以下,过滤白头正常,再检查;
  (3)把色谱柱出口端取下,如果压力不下降,则是柱子堵塞。
  处理方法:
  如果是缓冲盐堵塞,则用95%的水冲至压力正常。如果是一些强保留的物质导致堵塞,则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。
  假如,按上面的方法长时间冲洗压力都不下降,则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上,用流动相冲洗柱子。这时,如果柱压仍不下降,只有换柱子入口筛板,但是,一旦操作不甚,很容易造成柱效下降,所以,尽量少用。
  2、高效液相色谱柱压力过低
  压力过低的现象一般是由于系统泄漏
  处理方法:
  寻找各个接口处,特别是色谱柱两端的接口,把泄漏的地方旋紧即可。当然,还有一个原因就是泵里进了空气,但此时表现的往往是压力不稳,忽高忽低,更严重一点会导致泵无法吸上液体。
  处理方法:
  打开Purge阀,用3~5mL/min的流速冲洗,如果不行,则要用专用针筒在排空阀处借住外力将气泡吸出。
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