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赛默飞色谱柱损耗快?原因可能是脏了

发布日期: 2019-05-07
浏览人气: 99
   赛默飞色谱柱损耗快?原因可能是脏了
  为什么买的赛默飞色谱柱总是损耗得比较快呢?如果更换了不同品牌的柱子之后,仍然觉得赛默飞色谱柱的寿命表现均低于它们的普遍寿命。那就要看看是不是使用方法不当了哦。
  自查:
  1、是否使用同填料保护柱(相同品牌);
  2、流动相从配置到弃用在 12 小时以内;
  3、流动相瓶子严格清洗干燥,密封;
  4、滤头滤膜材质和品质是否选择错,注意查看是否使用后有溶解现象;
  5、使用厂家推荐的冲洗方式冲洗赛默飞色谱柱。
  以上自查项目改善后均不能解决,则采取第二步:
  沟通厂家,建议寄回厂家进行赛默飞色谱柱“解剖”,月旭经过 10 多年专业“解剖”各种问题赛默飞色谱柱,总结得出可能原因如下:
  原因是赛默飞色谱柱污染
  可能的原因
  1、样品组分吸附在赛默飞色谱柱的前端
  a、可能是由于样品在流动相中的溶解度低而沉淀出来的
  b、样品中有强保留物质(与键合相极性相似的物质)
  c、样品或者流动相中与填料表面发生微弱的不可预知的化学反应
  d、样品溶剂本身的pH值在赛默飞色谱柱的耐受临界值附近,而且进样体积较大(内径4.6mm,上样体积在 50μl 以上)
  通常这样的情况伴随柱压升高;或者柱压正常,一个色谱图中有些峰形异常,有些峰形正常。
  解决方法
  a、 尽量从根源上解决问题,选择合适的样品前处理技术,去除掉强保留物质,获得更加“干净”更加成分单一的样品;
  b、 使用保护柱,保护柱的选择尽量与分析柱同等填料,同等键合方法的保护柱,如果使用不同品牌填料、不同装填工艺的保护柱,在分离能力和保护方面可能得不到最好的效果,也不要使用更大粒径的保护柱,更大粒径或者装填较差的保护柱会因为它的峰展宽作用而导致分离能力下降。
  2、流动相“脏”了
  流动相在赛默飞色谱柱中的使用量比样品要大得多,不停的冲刷赛默飞色谱柱,如果流动相变质或者有其他的污染物,那对赛默飞色谱柱的污染会比样品更大,赛默飞色谱柱对流动相反而是一种净化,而且在运行梯度时,还会出现鬼峰。
  解决方法
  a、 流动相配置后尽快使用,最多不超过 12 小时;
  b、 有机相和盐相混合的流动相,更容易导致盐的析出,尽量使用在线混合,且在运行梯度时变化速率不宜太快,避免盐析出;
  c、 用专业的经过钝化处理过的溶剂瓶装流动相,切忌不能使用塑料瓶,做好密封,在更换流动相的时候同时更换试剂瓶;
  d、 水在接触空气或者离开制水设备以后会出现变质,现用现制,打开后尽快使用。
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